张锋团队推出新冠病毒CRISPR检测技术(2)

然而LAMP反应需要在温度为60℃的反应条件下进行，而Cas13a在这一温度下不够稳定。研究人员找到了名为AapCas12b的Cas酶，能够在LAMP反应条件下维持足够的活性，同时对指导RNA和反应中的添加剂进行了优化，让Cas酶介导的检测步骤维持足够的灵敏度。在实验条件下，这一检测的下限为100个新冠病毒RNA分子。

研究人员同时简化了提取RNA的步骤，只需要在含有新冠病毒的咽拭子或唾液样本中加入裂解病毒，释放RNA的试剂，无需纯化分离RNA，就可以将释放的病毒RNA用于检测。

▲STOPCovid检测的测试流程（图片来源：参考资料[3])

STOPCovid在检测患者样本时表现出100%特异性

在今年2月发布的研究中，由于患者样本的稀缺，研究人员只使用合成的RNA对新冠病毒CRISPR检测的表现进行了评估。这次，研究人员使用12个新冠病毒阳性和5个新冠病毒阴性患者咽拭子样本对STOPCovid检测的特异性和灵敏度进行了检验。每个样本都进行了三重测试（triplicate）。实验结果表明，在5个新冠病毒阴性的样本中，STOPCovid没有给出任何假阳性结果，而在12个新冠病毒阳性样本中，STOPCovid在11个样本的三次测试中都给出阳性结果，在1个样本的三次测试中两次给出阳性结果。

▲STOPCovid检测结果（图片来源：参考资料[2]）

研究人员表示，他们已经准备了一些初始试剂盒，能够让其它的研究人员进一步开发这一检测平台。研究团队已经与美国FDA进行交流，探索获得紧急使用授权（EUA）所需要的步骤。张锋教授在访谈中表示，这一检测的独特之处在于将化学反应简化为一个步骤，从而防治在多步反应中因为转移液体可能带来的样本污染。这使它更适合作为即使检测使用。

参考资料：

[1] New CRISPR-based test for Covid-19 could be a simple, cheap at-home diagnostic, scientists say. Retrieved May 5, 2020, from https://www.statnews.com/2020/05/05/crispr-covid-19-test-could-be-simple-cheap-at-home-diagnostic/

[2] STOPCOVID. Retrieved May 5, 2020, from https://www.stopcovid.science/

[3] Point-of-care testing for COVID-19 using SHERLOCK diagnostics. Retrieved May 5, 2020, from https://www.stopcovid.science/docs/STOPCovid%20Whitepaper.pdf

[4] Broughton et al., (2020). CRISPR–Cas12-based detection of SARS-CoV-2. Nature Biotechnology, https://doi.org/10.1038/s41587-020-0513-4.

[5] A protocol for detection of COVID-19 using CRISPR diagnostics, Retrieved February 14, 2020, from https://static1.squarespace.com/static/5b7c640be2ccd1703a3da4d3/t/5e46d16cf617da2f796f926e/1581699437272/COVID-19+detection+%28v20200214%29.pdf

原标题：张锋教授团队推出新一代新冠病毒CRISPR检测技术，让即时检测更便捷